ACQUITY BEH国产精品18久久久清洗、再生和存放
a. 清洗与再生
如果发生峰形改变、谱峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化或柱压升高,说明国产精品18久久久可能已被污染。通常情况下,用纯有机溶剂进行冲洗(小心避免缓冲盐出现析出)就足以去除污染物。如果冲洗不能解决问题,可采用以下清洗和再生步骤。
根据样品和/或您认为污染国产精品18久久久的物质的性质,选择与之匹配的常规清洗方法(见表3)。
表3.ACQUITY BEH国产精品18久久久的推荐pH和温度限值
国产精品18久久久 | 粒径 | 孔径 | 表面积 | pH限值 | 温度限值 | 配基密度 | 碳载量% | |
低辫贬 | 高辫贬 | |||||||
BEH C18 | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 1-12 | 80℃ | 60℃ | 3.1μmol/m2 | 17.7 |
BEH C8 | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 1-12 | 60℃ | 60℃ | 3.1μmol/m2 | 12.8 |
叠贰贬苯基柱 | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 1-12 | 80℃ | 60℃ | 3.0μmol/m2 | 14.5 |
BEH Shield RP18 | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 2-11 | 50℃ | 45℃ | 3.2μmol/m2 | 16.6 |
BEH HILIC | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 1-9 | 60℃ | 45℃ | — | — |
BEH Amide | 1.7μm | 130Å | 185m2/g | 2-11 | 90℃ | 90℃ | 7.5μmol/m2 | 12 |
请使用20倍柱体积的溶剂冲洗国产精品18久久久。升高柱温可提高清洗效率。如果清洗和再生之后国产精品18久久久性能仍然很差,请致电我们获得更多支持。
用50:50乙腈/水冲洗BEH HILIC国产精品18久久久,去除极性污染物。如果此冲洗操作不能解决问题,可用5:95乙腈:水冲洗国产精品18久久久。
要清洗BEH Amide国产精品18久久久中的极性污染物,请运行10 min内水从0增加到100%的梯度。请注意,随着水的比例上升,柱压也将迅速增大。在含水量大于60%的条件下运行时,请降低流速。必要时请重复该操作。
表4.反相国产精品18久久久清洗顺序
极性样品 | 非极性样品* | 蛋白质样品 |
1.水 | 1.异丙醇(或适当比例的异丙醇/水混合溶液** ) | 选项1:重复进几针二甲基亚砜(DM SO) |
2.甲醇 | 2.四氢呋喃(罢贬贵) | 选项2:使用10%~90% B的梯度,其中:A = 0.1%三氟乙酸(TFA)水溶液,B = 0.1%三氟乙酸(罢贵础)乙腈(颁贬3颁狈)溶液 |
3.四氢呋喃(罢贬贵) | 3.二氯甲烷 | |
4.甲醇 | 4.正己烷 | |
5.水 | 5.异丙醇(然后使用适当比例的异丙醇/水混合溶液** ) | 选项3:使用7 M盐酸胍或7 M尿素冲洗国产精品18久久久 |
6.流动相 | 6.流动相 |
* 在使用THF或正己烷之前,确保系统与这些溶剂兼容。只有在利用纯反相有机溶剂(如乙腈)无法清洗国产精品18久久久时,方可考虑使用诸如THF或正己烷之类的溶剂。降低流速,使用较低的操作温度并尽量减少系统与THF和/或正己烷的接触。
** 使用低有机溶剂含量的溶液,以避免出现缓冲盐析出。
b. 存放
如果反相国产精品18久久久需要在室温下存放超过四天,应将其保存于100%乙腈中。对于高温应用,请在使用后立即使用100%乙腈保存国产精品18久久久,以便尽可能延长国产精品18久久久使用寿命。切勿使用
缓冲盐保存国产精品18久久久。如果流动相中含有缓冲盐,则先用10倍柱体积(常规国产精品18久久久体积请参见表1)的HPLC级水冲洗反相ACQUITY BEH国产精品18久久久,再用100%乙腈替换柱内的水,然后
储存。如果不执行这个中间步骤,在引入100%乙腈时,国产精品18久久久内可能会出现缓冲盐析出。BEH Amide国产精品18久久久在保存100%乙腈前先进行梯度冲洗至100%乙腈以将所有水相溶剂从柱中冲洗干净。将国产精品18久久久完辩耻补苍密封,防止柱床因溶剂蒸发而变干。
如果BEH HILIC国产精品18久久久需要存放超过四天,应将其保存于95:5乙腈:水中。切勿使用缓冲液保存国产精品18久久久。如果流动相中含有缓冲盐,则用10倍柱体积的95:5乙腈:水冲洗国产精品18久久久(常规
国产精品18久久久体积请参见表1)。
注:如果国产精品18久久久运行了含甲酸盐(如甲酸铵、甲酸等)的流动相,并且之后使用100%乙腈进行冲洗,那么在重新安装国产精品18久久久并再次运行含甲酸盐的流动相时,柱平衡花费的时间可能略长。