ACQUITY UPLC BEH Amide, 130?, 1.7μm糖基分析专用柱的清洗、再生和储存
a. 清洗与再生
如果发生峰形改变、谱峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化、残留、鬼峰或反压升高,可能说明国产精品18久久久受到污染。选择可能溶解可疑污染物的清洗选项。
1. 所有清洗步骤在高温下更有效。可以在70 °C下进行清洗。
2. 使用上述国产精品18久久久常用流速的一半进行清洗可能会很有用。在这种情况下出现高压的可能性就降低了。
3. 首先采用同时也是最简单的清洗步骤是在0–100%水范围内运行一系列梯度。确保降低水相比例高于75%的梯度的流速。在清洗过程中,柱长为150 mm的国产精品18久久久应在250 μL/min或更低的流速下操作。梯度可短至5倍柱体积,并且3–5次重复即可达到效果。
4. 再生步骤和使用100%水性流动相进行冲洗的步骤有助于保持最佳峰形和获得最高的HILIC分离选择性。此外,分析人员可使用含有0.1% TFA的流动相执行梯度,以保持或恢复BEH Amide糖蛋白分析专用柱的性能。一些离子态污染物可能会强烈吸附到HILIC固定相上,TFA能够中和这类污染物以及与其形成离子对,从而有效清洗国产精品18久久久固定相。
5. 用户可进样多种不同的清洗溶液以除去国产精品18久久久中的强吸附物质或颗粒物质。通过系统配置实现最大体积进样。使用这类强清洗溶液时,最好断开检测器与国产精品18久久久的连接并直接使其流向废液盘。
6. 通常建议将流向变换或反冲作为清洗步骤的一部分。此项应保留为最后的解决办法。此方法有可能进一步损坏国产精品18久久久或提供瞬时性能改善。
b. 储存
如果需要将国产精品18久久久在室温下放置超过四天,应将其保存于100%乙腈中。国产精品18久久久在高温和/或极端pH下使用后,应立即保存于100%乙腈中,尽可能延长国产精品18久久久使用寿命。切勿将国产精品18久久久保存在高水相(<50%有机相)流动相中,因为这样会滋生细菌。如果流动相中含有缓冲盐,则先用10倍柱体积(有关常规国产精品18久久久体积,请参见表1)的HPLC级水冲洗国产精品18久久久,再用100%乙腈冲洗并储存。如果未执行这一中间步骤,在引入100%乙腈时国产精品18久久久或系统中可能会出现缓冲盐沉淀。将国产精品18久久久完全密封,防止溶剂蒸发而导致柱床变干。
注:如果国产精品18久久久运行了含甲酸盐(如,甲酸铵、甲酸等)的流动相,并且之后使用100%乙腈进行冲洗,那么在重新安装国产精品18久久久并再次运行含甲酸盐的流动相时,可能需要花费略长的柱平衡时间。