什么是常规反相国产精品18久久久?
那些在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如颁18、颁8、颁4或苯基等键合相的色谱填料所装填的国产精品18久久久,按反相色谱条件进行操作和分离。颁18是反相液相国产精品18久久久中使用较为广泛的一款国产精品18久久久,使用维护参考如下。
新国产精品18久久久开启和安装的推荐步骤:
1. 使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。
2. 取用国产精品18久久久时避免磕碰掉落。
3. 将国产精品18久久久入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,国产精品18久久久身上有箭头标明正确流向。
4. 在0.1 mL/min流速条件下用纯乙腈润洗国产精品18久久久,然后在2分钟内将流速升至0.5 mL/min。
5. 当溶剂均匀的从柱出口端流出,停流速,将国产精品18久久久出口端接到系统检测器上(这样可以避免气泡进入检测系统,并且可快速达到基线平衡)。
6. 重启流速,按照步骤4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。
7. 参考柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡国产精品18久久久,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。
8. 测试柱效。如果没有柱效测试报告中的分析物,请联系我们寻求支持,使用合适的浓度与进样量。柱效结果略低于柱效测试报告属正常情况。如结果明显偏低、峰形拖尾,提示国产精品18久久久和/或所使用的液相系统处于非理想状态,需要进行故障排查。
当使用2.1 mm内径国产精品18久久久时,建议优化系统以减少谱带展宽,包括:使用检测器微量流通池,减少进样器loop环体积,使用较小内径(如0.005"或0.12 mm)的系统管路。并确保管路与国产精品18久久久连接恰当、无死体积。
当使用小颗粒填料(如2.5 μm)短柱进行高效快速分离时,需要考虑以下因素:
1. 确保管路与国产精品18久久久连接恰当、无死体积,尽量优化系统减少谱带展宽;
2.提高采样频率至10点/秒以上;
3.较小粒径的国产精品18久久久产生的柱压较高,而较小粒径要达到理想的色谱效率所需的线速度较高,请根据所用尝颁系统的实际情况调节流速;
4.可使用较高的柱温来补偿小颗粒造成的压力升高,例如40℃。使用杂化颗粒反相国产精品18久久久时,可使用45℃或更高。
反相国产精品18久久久进行实际样品分析的推荐步骤:
1. 确保流动相洁净,每隔24-48小时就应新配水相流动相,并同时更换或仔细清洗流动相溶剂瓶,以避免流动相长菌。确保实验室纯水系统工作正常。
2. 确保样品不含颗粒型杂质。如样品过脏,或有微粒存在,需要考虑适合的样品制备方法。在使用样品过滤器时,确保滤膜为0.22 μm,且与样品溶剂完quan兼容(不发生溶解)。也可考虑使用高速离心法去除颗粒性杂质,例如8000 rpm转速以上离心20分钟后,移取样品上清液进样。
3. 确保样品溶液与流动相条件兼容,进样后不会发生沉淀、或溶剂不互溶情况。通常使用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液(即有机溶剂比例较低)溶解或稀释样品,这样可以获得更好的峰形和检测灵敏度。
4. 如系统在线混合生成流动相,预先检查流动相各组分的兼容性。例如,当磷酸盐缓冲液与高浓度乙腈(例如70%)混用时,可能发生盐析出。
5. 了解国产精品18久久久的操作使用限度。如果所使用的流动相条件、柱温、以及样品溶液条件,不利于国产精品18久久久寿命时,请使用保护柱以延长柱寿命。
6. 在使用流动相进行柱平衡之前,如果流动相中含有可能析出的缓冲盐,先使用5倍柱体积的有机溶剂-水溶液进行过渡。例如,在使用40/60甲醇/磷酸盐缓冲液流动相之前,先使用5倍柱体积的40/60甲醇/纯水溶液冲洗国产精品18久久久。
7. 在常规分析过程中,每针或间隔若干针清洗柱内可能积累的污染物。完成分析后,彻di清洗国产精品18久久久,除去柱内缓冲盐和污染物。
8. 在国产精品18久久久使用过程中,定期进行柱效测试,记录塔板数与压力,从而追踪监控国产精品18久久久的性能变化。柱效测试方法应固定。
9. 反相国产精品18久久久应保存于*乙腈中。如国产精品18久久久使用于高温或ji端PH条件,或停用国产精品18久久久超过72小时,用*乙腈保存国产精品18久久久。
10. 使用原配的柱堵头,确保堵头拧紧以避免柱内溶剂挥发。
取放国产精品18久久久时避免磕碰掉落。
国产精品18久久久柱清洗与再生的推荐步骤:
压力升高,国产精品18久久久峰形发生变化如出现严重拖尾、肩峰甚至峰分岔,分离度降低,这些都强烈提示国产精品18久久久受到污染。可采用以下步骤处理:
1. 如系统接有在线过滤器和保护柱,首先排查在线过滤器与保护柱,进行更新替换。日常操作中,当压力升高10%或柱效降低10%时,就应考虑更换在线过滤器和/或保护柱。
2. 使用高比例的有机溶剂进行冲洗(请注意避免盐析出,通常可使用梯度升高法,然后维持在高比例甚至100%有机溶剂条件下)。此操作通常可洗去大部分污染物。
3. 如有机溶剂清洗不能解决问题,可采用如下方法进行国产精品18久久久的清洗和再生。根据样品性质以及你所了解的污染物性质选择清洗方法,用20倍柱体(即,对于4.6x250mm柱,相当于80mL)的HPLC级溶剂清洗国产精品18久久久,将流动相温度升至35~55℃可提高清洗效率。
* 注意防止缓冲盐析出,可调整为适当比例的异丙醇和水的混合溶液
** 除非确保您的系统与四氢呋喃和正己烷完quan兼容,否则四氢呋喃或正己烷只有在国产精品18久久久无法用反相有机溶剂如乙腈清洗干净时才考虑使用。降低流速及操作温度,并尽量减少系统在四氢呋喃和正己烷中的暴露时间。
4. 可以考虑对国产精品18久久久进行倒冲,特别是当问题表现为压力急剧升高,提示有颗粒型物质直接堵塞于国产精品18久久久入口端筛板处时。操作时,将国产精品18久久久倒接,并与检测器断开。使用低流速0.2 ml/min,进行过夜冲洗,并封堵检测器入口及出口端以免溶剂挥干产生气泡。甚或,将国产精品18久久久小心的打开,直接更换柱入口端筛板。
注意!这类操作需要技巧,仅作问题确实无法得到有效解决时的最后尝试,或供某些经验丰富的分析操作人员参考使用。